測(cè)量的步驟如下：
1.酶液提?。悍Q取25℃下萌發(fā)3～4天的小麥種子1.0g（芽長1.0~1.5cm），置研缽中，加少量石英砂和2ml蒸餾水，研磨成勻漿后轉(zhuǎn)入離心管中，用7ml蒸餾水分次將殘?jiān)慈腚x心管提取液在室溫下放置提取15～20min，每隔數(shù)分鐘攪動(dòng)1次，使其充分提取。
然后在3000rpm轉(zhuǎn)速下離心10min，將上清液倒入50ml容量瓶中，加蒸餾水定容至刻度，搖勻，即為淀粉酶原液。吸取上述淀粉酶原液5ml，放入50ml容量瓶中，用蒸餾水定容至刻度搖勻，即為淀分酶稀釋液。
2.麥芽糖標(biāo)準(zhǔn)曲線制作：取7支干凈的具塞刻度試管，編號(hào)，按表33-1加入試劑。
表33-1 制作麥芽糖標(biāo)準(zhǔn)曲線配方表
試劑管號(hào) 1 2 3 4 5 6 7
麥芽糖標(biāo)準(zhǔn)液(ml) 0 0.2 0.4 0.8 1.2. 1.6 2.0
蒸餾水(ml) 2.0 1.8 1.6 1.2 0.8 0.4 0
麥芽糖含量(mg) 0 0.2 0.4 0.8 1.2 1.6 2.0
3,5-二硝基水楊酸(ml) 2 2 2 2 2 2 2
搖勻，置沸水中浴中煮沸5min。取出后流水冷卻，加蒸餾水定容至20ml。以1號(hào)管作為空白調(diào)零點(diǎn)，在540nm波長下比色測(cè)定。以麥芽糖含量為橫坐標(biāo)，吸光度值為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
3.酶活力的測(cè)定：取6支干凈的具塞刻度試管,編號(hào),按表33-2進(jìn)行操作。
表33-2 配活力的測(cè)定配方表
操作項(xiàng)目管號(hào) Ⅰ-1 Ⅰ-2 Ⅰ-3 Ⅱ-1 Ⅱ-2 Ⅱ-3
淀粉酶原液(ml) 1.0 1.0 1.0 0 0 0
鈍化β-淀粉酶 置70℃水浴中15min，取出后在流水中冷卻
淀粉酶稀釋液(ml) 0 0 0 1 1 1
DNS試劑(ml) 2.0 0 0 2.0 0 0
預(yù)保溫 40℃恒溫水浴中保溫10min
1%淀粉溶液(ml)(40℃) 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0
保溫 40℃恒溫水浴中準(zhǔn)確保溫5min
DNS試劑(ml) 0 2.0 2.0 0 2.0 2.0
搖勻，置沸水浴中5min，取出后冷卻，加蒸餾水至20ml。搖勻，在540nm波長下比色，記錄測(cè)定結(jié)果。
4.結(jié)果計(jì)算：用Ⅰ-2、Ⅰ-3吸光度平均值與Ⅰ-1吸光度值之差，在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出相應(yīng)的麥芽糖含量（mg），再按下式計(jì)算α-淀粉酶的活力（Aα），淀粉酶活性以麥芽糖mg·g－1·min－1表示：
Aα=
Ⅱ-2、Ⅱ-3吸光度平均值與Ⅱ-1吸光度值之差，在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出相應(yīng)的麥芽糖含量（mg），按下式計(jì)算（α+β）-淀粉酶總活力AT：
AT＝
式中 A—淀粉酶活性，Aα為α-淀粉酶的活性，AT為淀粉酶總活性，主要是α、β淀粉酶的活性；
Cα—α-淀粉酶水解淀粉生成的麥芽糖量（查標(biāo)準(zhǔn)曲線求值，以下同）；
CT—（α+β）淀粉酶共同水解淀粉生成的麥芽糖量；
V1—顯色所用酶液體積（ml）；
t—酶作用時(shí)間（min）；
Vt—樣液稀液總體積（α-淀粉酶為50ml,α+β淀粉酶為500ml）；
FW—樣品鮮重（g）。
